Acúmulo de nitrito e particionamento de nicho bacteriano anammox no meio do Ártico

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Nov 10, 2023

Acúmulo de nitrito e particionamento de nicho bacteriano anammox no meio do Ártico

ISME Communications volume 3,

ISME Communications volume 3, Número do artigo: 26 (2023) Citar este artigo

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Ao consumir amônia e nitrito, as bactérias anammox formam uma importante guilda funcional na ciclagem de nitrogênio em muitos ambientes, incluindo sedimentos marinhos. No entanto, sua distribuição e impacto no importante substrato nitrito não foram bem caracterizados. Aqui, combinamos abordagens biogeoquímicas, microbiológicas e genômicas para estudar bactérias anammox e outros grupos de ciclagem de nitrogênio em dois núcleos de sedimentos recuperados da Cordilheira do Oceano Ártico (AMOR). Observamos acúmulo de nitrito nesses núcleos, fenômeno também registrado em 28 outros sítios de sedimentos marinhos e em ambientes aquáticos análogos. O máximo de nitrito coincide com a abundância reduzida de bactérias anammox. As abundâncias de bactérias anammox foram pelo menos uma ordem de grandeza maiores do que as dos redutores de nitrito e os máximos de abundância anammox foram detectados nas camadas acima e abaixo do máximo de nitrito. O acúmulo de nitrito nos dois núcleos da AMOR co-ocorre com uma partição de nicho entre duas famílias de bactérias anammox (Candidatus Bathyanammoxibiaceae e Candidatus Scalinduaceae), provavelmente dependente da disponibilidade de amônio. Através da reconstrução e comparação dos genomas anammox dominantes (Ca. Bathyanammoxibius amoris e Ca. Scalindua sediminis), revelamos que Ca. B. amoris tem menos transportadores de amônio de alta afinidade do que Ca. S. sediminis e não tem capacidade de acessar substratos alternativos e/ou fontes de energia como uréia e cianato. Esses recursos podem restringir Ca. Bathyanammoxibiaceae às condições de maiores concentrações de amônio. Essas descobertas melhoram nossa compreensão sobre a ciclagem de nitrogênio em sedimentos marinhos, revelando acúmulo coincidente de nitrito e particionamento de nicho de bactérias anammox.

A ciclagem do nitrogênio nos ecossistemas é intrinsecamente controlada por uma rede de processos mediados por microorganismos. Em um ecossistema, o novo nitrogênio biodisponível (ou fixo) é gerado por diazotrofia e pode ser convertido de volta em N2 por dois processos de perda de nitrogênio: desnitrificação e oxidação anaeróbica de amônio (anammox) [ver a revisão em, por exemplo, [1]]. Os dois últimos metabolismos anaeróbios são geralmente favorecidos em ambientes com baixo teor de oxigênio, seja nas zonas pelágicas mínimas de oxigênio do oceano ou nos sedimentos bentônicos [2]. Estimativas anteriores sugerem que a perda fixa de nitrogênio no bentos é 1,3 a 3 vezes maior em magnitude do que a coluna de água em uma base global [3,4,5]. Portanto, os processos sedimentares de perda de nitrogênio desempenham um papel crucial na regulação da abundância de nitrogênio biodisponível nos habitats marinhos. O nitrito é um substrato crucial tanto para o anammox quanto para a desnitrificação [6, 7], cuja disponibilidade exerce um profundo controle sobre a magnitude da perda de nitrogênio [8]. No entanto, o nitrito raramente se acumula em níveis tão altos quanto o nitrato e a amônia nos sedimentos marinhos, fazendo com que a presença e as vias de transformação do nitrito nesse vasto ambiente sejam amplamente negligenciadas. Bactérias anammox estão entre as maiores consumidoras de nitrito, devido a sua exigência estrita deste composto para oxidar amônio.

Desde a sua descoberta no ambiente marinho há duas décadas [8], o anammox demonstrou ser um contribuinte significativo para a perda fixa de nitrogênio [por exemplo, [9]. Entre as bactérias anammox marinhas previamente reconhecidas (filiadas às famílias Candidatus Brocadiaceae e Candidatus Scalinduaceae), membros de Ca. Scalinduaceae tem sido consistentemente detectada em sedimentos marinhos [10,11,12,13], e várias culturas de enriquecimento foram obtidas de sedimentos costeiros [por exemplo, Ca. Scalindua japonica [14] e Ca. Escalindua profunda [15]]. No entanto, embora aparentemente onipresente, Ca. Scalinduaceae pode não ser a única família bacteriana anammox presente em sedimentos marinhos. Recentemente, examinando genomas montados por metagenomas de sedimentos da Cordilheira do Oceano Ártico (AMOR) e do ambiente de águas subterrâneas, uma nova família de bactérias anammox foi descoberta (ou seja, Candidatus Bathyanammoxibiaceae [16]). Nos núcleos AMOR, tanto Ca. Scalinduaceae e Ca. Bathyanammoxibiaceae está confinada na zona de transição nitrato-amônia e Ca. Bathyanammoxibiaceae às vezes pode superar significativamente suas contrapartes de Ca. Scalinduaceae [16]. A coexistência de duas linhagens funcionalmente (quase) idênticas em sedimentos AMOR levantou a questão de saber se essas famílias ocupam o mesmo nicho e que influência podem ter na distribuição e transformações do nitrito.

2 consecutive depths with detectable nitrite concentrations) were only detected in two cores: GS14-GC04 and GS16-GC04 (see results below). These two cores offered an opportunity to explore the underlying mechanism(s) of nitrite accumulation, a unique geochemical phenomenon that has been well studied in seawaters of oxygen deficient zones [e.g., [18]] but not in marine sediments. Because the general geochemical context [13], microbiology data [13], and anammox bacteria communities [16] of core GS16-GC04 have been published previously, below we provide thorough descriptions for core GS14-GC04./p>97% nucleotide sequence identity using UPARSE [86]. Most of the OTUs detected in the extraction blanks (negative controls) were manually removed, except for a few OTUs that may be introduced into the blanks by cross-contamination. Overall, >99.9% of reads in the negative controls were removed. Samples were subsampled to 20,000 reads for each sediment horizon. The taxonomic classification of OTUs was performed using the lowest common ancestor algorithm implemented in the CREST package [87] with the SILVA 138.1 Release as the reference. The relative abundance of anammox bacteria was taken as the total percentage of the OTUs affiliated with the families Ca. Scalinduaceae and Ca. Bathyanammoxibiaceae [16]. The distribution of individual anammox OTUs was visualized in heatmaps generated using the R package ggplot2 [88]./p>90% completeness and <5% redundancy) of Ca. Bathyanammoxibiaceae, we focused on the sediment horizon of 55 cm of core GS16-GC05, because our previous survey indicated that this particular sediment horizon harbors the highest relative abundance of Ca. Bathyanammoxibiaceae in the total archaea and bacteria community [16]. We extract the total DNA from 6.4 g of sediment (~0.4 - 0.6 g sediment in each of the 12 individual lysis) using PowerLyze DNA extraction kits (MO BIO Laboratories, Inc.) following the manufacturer's instructions. The DNA extracts were iteratively eluted from the 12 spin columns into 100 µL of ddH2O for further analysis./p>50% similarity were retained), to identify its close relatives. These sequences were complemented with known nitrifiers (e.g. ammonia-oxidizing bacteria (AOB) from the genera of Nitrosospira, Nitrosomonas, Nitrososcoccus, nitrite-oxidizing bacteria (NOB) from Nitrospira and Nitrospina, and ammonia-oxidizing archaea (AOA) from the Thaumarchaeota phylum) and aligned using MAFF-LINSi [107]. The alignment was trimmed using trimAl [111] with the mode of "automated". A maximum likelihood phylogenetic tree was reconstructed using IQ-TREE v.1.5.5 [108] with the LG + F + R7 as the best-fit substitution model and 1,000 ultrafast bootstraps./p>

2.0.CO;2" data-track-action="article reference" href="https://doi.org/10.1130%2F0016-7606%281974%2985%3C1661%3ASDITNS%3E2.0.CO%3B2" aria-label="Article reference 62" data-doi="10.1130/0016-7606(1974)852.0.CO;2"Article Google Scholar /p>